Proizvodi

Učinci deterdženata na aktivnost atpaze P-glikoproteina: razlike u poremećajima bazalne aktivnosti i aktivnosti ovisnih o verapamilu.

P-glikoprotein (P-gp), glikoprotein plazmatske membrane povezan s fenotipom rezistencije na više lijekova, odgovoran je za ATP-ovisni efluks različitih amfifilnih lijekova.Koristeći membranske vezikule pripremljene iz stanične linije otporne na više lijekova DC-3F/ADX, proučavali smo poremećaje bazalne (tj. u odsutnosti lijeka) i aktivnosti P-gp ATPaze ovisne o verapamilu izazvane različitim deterdžentima, kod neotapanja, kao i kod solubilizirajućih koncentracija.Progresivna solubilizacija membrane s povećanjem koncentracije deterdženta praćena je pokusima raspršenja svjetlosti i centrifugiranja.Za koncentracije deterdženta koji ne otapaju, svi testirani deterdženti osim DOC-a izazvali su djelomičnu inhibiciju aktivnosti P-gp ATPaze, što nije bilo u korelaciji s količinom različitih testiranih deterdženata ugrađenih u membrane.Analiza aktivacije P-gp izazvane verapamilom otkriva da je aktivnost P-gp ATPaze različito modulirana različitim deterdžentima u koncentracijama koje ne otapaju.Stoga je vjerojatnije da će doći do specifičnih interakcija između P-gp-a i deterdženata, a ne do globalne perturbacije membrane.Nakon solubilizacije različitim testiranim deterdžentima, aktivnost bazalne P-gp ATPaze bila je gotovo potpuno inhibirana, osim u prisutnosti CHAPS-a koji je uspio očuvati ovu aktivnost na razini usporedivoj s onom izmjerenom u prirodnim membranama.Međutim, aktivacija P-gp ATPaze izazvana verapamilom izgubljena je tijekom solubilizacije P-gp pomoću CHAPS-a, ali se oporavila nakon razrjeđivanja CHAPS-a ispod njegove kritične micelarne koncentracije.Ova opažanja ukazuju na specifične interakcije između P-gp i CHAPS molekula unutar miješanih micela.U cjelini, naši podaci koji dokazuju specifične interakcije P-gp/detergenti su u skladu s lokacijom transportnih mjesta lijeka na P-gp transmembranskim domenama.