Proizvodi

Preko 70% glioma niskog stupnja nosi heterozigotnu mutaciju R132H u genu koji kodira izocitrat dehidrogenazu 1 (IDH1).To daje enzimu novu sposobnost pretvaranja α-ketoglutarata u 2-hidroksiglutarat, što u konačnici dovodi do tumorigeneze.Glavni izvor proizvodnje 2-hidroksiglutarata je glutamin, koji je kod raka također izvor anapleroze ciklusa trikarboksilne kiseline (TCA).Alternativni izvor anapleroze je tok piruvata preko piruvat karboksilaze (PC), što je uobičajeni put u normalnim astrocitima.Cilj ove studije bio je utvrditi služi li PC kao izvor TCA anapleroze u IDH1 mutantnim stanicama u kojima se glutamin koristi za proizvodnju 2-hidroksiglutarata. Istraženi su besmrtni normalni ljudski astrociti projektirani za ekspresiju heterozigotnog mutantnog IDH1 ili divljeg tipa IDH1.Protok piruvata preko PC-a i preko piruvat-dehidrogenaze (PDH) određen je uporabom spektroskopije magnetske rezonancije za ispitivanje obilježavanja [2-¹³C]glukoze izvedenog ¹³C-označenog glutamata i glutamina.Testovi aktivnosti, RT-PCR i Western blotting korišteni su za ispitivanje ekspresije i aktivnosti relevantnih enzima.Podaci Atlasa genoma raka (TCGA) analizirani su kako bi se procijenila ekspresija enzima u uzorcima ljudskog glioma. U usporedbi sa stanicama divljeg tipa, mutirane IDH1 stanice značajno su povećale frakcijski protok kroz PC.To je bilo povezano sa značajnim povećanjem PC aktivnosti i izražaja.Istodobno, aktivnost PDH značajno se smanjila, vjerojatno posredovano značajno povećanom inhibitornom fosforilacijom PDH pomoću PDH kinaze 3. U skladu s opažanjem u stanicama, analiza TCGA podataka pokazala je značajan porast ekspresije PC-a u uzorcima ljudskog glioma s ekspresijom mutantnog IDH-a u usporedbi s divljim tipa IDH. Naši nalazi sugeriraju da promjene u PC i PDH mogu biti važan dio stanične prilagodbe na mutaciju IDH1 i mogu poslužiti kao potencijalne terapijske mete.