Proizvodi

Razvili smo novi sustav dostave male interferirajuće RNK (siRNA) koristeći ternarni kompleks s polietileniminom (PEI) i γ-poliglutaminskom kiselinom (γ-PGA), koji je pokazao učinak utišavanja i nije imao citotoksičnost.Binarni kompleksi siRNA s PEI bili su približno 73-102 nm veličine čestica i 45-52 mV ζ-potencijala.Učinak utišavanja siRNA/PEI kompleksa povećavao se s povećanjem PEI, a siRNA/PEI kompleksi s omjerom naboja većim od 16 pokazali su značajno obaranje luciferaze u staničnoj liniji mišjeg karcinoma debelog crijeva koja redovito izražava luciferazu (Colon26/Luc stanice).Međutim, jaka citotoksičnost i aglutinacija krvi primijećeni su u kompleksu siRNA/Lipofectamine i kompleksu siRNA/PEI16.Punjenje kationskih kompleksa s anionskim spojem pokazalo se kao obećavajuća metoda za prevladavanje ove toksičnosti.Stoga smo pripremili ternarne komplekse siRNA s PEI (omjer naboja 16) dodatkom γ-PGA kako bismo smanjili citotoksičnost i isporučili siRNA.Kao što je i očekivano, citotoksičnost ternarnih kompleksa smanjila se s povećanjem sadržaja γ-PGA, što je smanjilo ζ-potencijal kompleksa.Snažan učinak utišavanja usporediv s kompleksom siRNA/Lipofectamine otkriven je u ternarnim kompleksima uključujući γ-PGA s anionskim površinskim nabojem.Visoka ugradnja ternarnih kompleksa u stanice Colon26/Luc potvrđena je fluorescentnom mikrokopijom.Nakon postizanja nokdauna egzogeno transfektiranog gena, sposobnost kompleksa da posreduje u nokdaunu endogenog gena za domaćinstvo, gliceraldehid 3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH), procijenjena je u stanicama B16-F10.Ternarni kompleks (kompleks siRNA/PEI16/γ-PGA12) pokazao je značajan učinak obaranja GAPDH.Stoga smo razvili koristan sustav isporuke siRNA.