L-Proline Cas: 147-85-3 99% bijeli prah
| Kataloški broj | XD90293 |
| ime proizvoda | L-prolin |
| CAS | 147-85-3 |
| Molekularna formula | C5H9NO2 |
| Molekularna težina | 115.13046 |
| Pojedinosti o pohrani | Ambijentalni |
| Harmonizirani tarifni broj | 29339980 |
Specifikacija proizvoda
| Ispitivanje | 99%min |
| Izgled | bijeli prah |
| Specifična rotacija | -84,5 do -86 |
| Teški metali | <15 ppm |
| AS | <1 ppm |
| Ph | 5.9 - 6.9 |
| SO4 | <0,050% |
| Fe | <30 ppm |
| Gubitak sušenjem | <0,3% |
| Ostatak nakon paljenja | <0,10% |
| NH4 | <0,02% |
| Cl | <0,050% |
| Stanje rješenja | >98% |
Razumijevanje metabolizma mikrobnog domaćina ključno je za razvoj i optimizaciju biokatalitičkih procesa temeljenih na cijeloj stanici, jer diktira učinkovitost proizvodnje.Ovo posebno vrijedi za redoks biokatalizu gdje se koriste metabolički aktivne stanice zbog regenerativnog kapaciteta kofaktora/kosupstrata koji je endogen u domaćinu.Rekombinantna Escherichia coli korištena je za prekomjernu proizvodnju prolin-4-hidroksilaze (P4H), dioksigenaze koja katalizira hidroksilaciju slobodnog L-prolina u trans-4-hidroksi-L-prolin s a-ketoglutaratom (a-KG) kao kosupstratom.U ovom biokatalizatoru cijele stanice, središnji metabolizam ugljika osigurava potrebni kosupstrat a-KG, povezujući biokatalitičku izvedbu P4H izravno s metabolizmom ugljika i metaboličkom aktivnošću.Primjenom eksperimentalnih i računalnih bioloških alata, kao što su metabolički inženjering i analiza (13)C-metaboličkog toka ((13)C-MFA), istražili smo i kvantitativno opisali fiziološki, metabolički i bioenergetski odgovor biokatalizatora cijele stanice. do ciljane biokonverzije i identificirana moguća metabolička uska grla za daljnji racionalni inženjering puta. Soj E. coli s nedostatkom razgradnje prolina konstruiran je brisanjem gena putA koji kodira prolin dehidrogenazu.Biotransformacije cijele stanice s ovim mutantnim sojem dovele su ne samo do kvantitativne hidroksilacije prolina, već i do udvostručenja specifične brzine stvaranja trans-4-L-hidroksiprolina (hyp), u usporedbi s divljim tipom.Analiza protoka ugljika kroz središnji metabolizam mutantnog soja otkrila je da povećana potražnja a-KG za aktivnost P4H nije pojačala protok koji stvara a-KG, što ukazuje na strogo reguliran rad TCA ciklusa pod proučavanim uvjetima.U soju divljeg tipa, sinteza i kataliza P4H uzrokovale su smanjenje prinosa biomase.Zanimljivo je da je soj ΔputA dodatno kompenzirao povezani gubitak ATP-a i NADH smanjenjem energetskih zahtjeva za održavanje pri relativno niskim stopama unosa glukoze, umjesto povećanja aktivnosti TCA. Utvrđeno je da nokaut putA u rekombinantnoj E. coli BL21(DE3)(pLysS) biti obećavajući za produktivnu katalizu P4H ne samo u smislu prinosa biotransformacije, već i u pogledu stopa biotransformacije i unosa prolina te prinosa hyp na izvoru energije.Rezultati pokazuju da, nakon nokauta putA, spajanje TCA-ciklusa na hidroksilaciju prolina preko kosupstrata a-KG postaje ključni ograničavajući čimbenik i cilj za daljnje poboljšanje učinkovitosti biotransformacija ovisnih o a-KG.
