Proizvodi

Ova studija opisuje jednostavnu i učinkovitu metodu koja koristi tekućinsku kromatografiju visoke učinkovitosti (HPLC) u kombinaciji s fluorescentnom detekcijom za određivanje kinetičkih parametara unosa glutamata u živčano tkivo.Retinalno tkivo dobiveno od pilića starih 7 dana inkubirano je s poznatim koncentracijama glutamata (50-2000 µM) 10 minuta, te su izmjerene razine o-ftaldehida (OPA)-derivatiziranog neurotransmitera u mediju za inkubaciju.Procjenom razlike između početne i konačne koncentracije glutamata u mediju karakteriziran je mehanizam zasićenja (K(m)=8,2 i V(max)=9,8 nmol/mg proteina/min).Ova je mjera bila uvelike ovisna o natriju i temperaturi, snažno podupirući da je mehanizam za smanjenje koncentracije doista unos prijenosnika visokog afiniteta.Uz to, naši su rezultati također pokazali da je cinkov klorid (inhibitor prijenosnika glutamata/aspartata) izazvao smanjenje unosa glutamate ovisno o koncentraciji, pokazujući specifičnost naše metodologije.Sve u svemu, ovaj rad karakterizira alternativnu metodologiju za procjenu unosa glutamata u živčano tkivo pomoću HPLC-a.Ovaj bi pristup mogao biti važan alat za studije povezane s karakterizacijom sitnih promjena u transportu glutamata povezanih s ozljedom središnjeg živčanog sustava.