X-GAL CAS:7240-90-6 98% bijeli do gotovo bijeli kristalni prah
| Kataloški broj | XD90008 |
| ime proizvoda | X-Gal (5-brom-4-klor-3-indolil-beta-D-galaktopiranozid) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Molekularna formula | C14H15BrClNO6 |
| Molekularna težina | 408.63 |
| Pojedinosti o pohrani | -2 do -6 °C |
| Harmonizirani tarifni broj | 29400000 |
Specifikacija proizvoda
| Izgled otopine | Bistra, bezbojna do svijetlo žuta otopina (50 mg/ml u DMF:MeOH, 1:1) |
| Specifična optička rotacija | -61,5 +/- 1 |
| Izgled | Bijeli do gotovo bijeli kristalni prah |
| HPLC čistoće | min. 99% |
| Topivost (5 % u DMF-u) | Topiv (5% w/v, DMF) |
| Voda KF | maksimalno 1% |
| Test (HPLC na bezvodnoj bazi) | min 98% w/w |
Upotreba X-gal
X-gal (također skraćeno BCIG za 5-brom-4-kloro-3-indolil-β-D-galaktopiranozid) je organski spoj koji se sastoji od galaktoze povezane sa supstituiranim indolom.Spoj su sintetizirali Jerome Horwitz i suradnici 1964. godine. Formalni kemijski naziv često se skraćuje na manje točne, ali i manje glomazne fraze kao što je bromokloroindoksil galaktozid.X iz indoksil može biti izvor X u kontrakciji X-gal.X-gal se često koristi u molekularnoj biologiji za ispitivanje prisutnosti enzima, β-galaktozidaze, umjesto njegove uobičajene mete, β-galaktozida.Također se koristi za otkrivanje aktivnosti ovog enzima u histokemiji i bakteriologiji.X-gal je jedan od mnogih indoksilnih glikozida i estera koji daju netopljive plave spojeve slične indigo boji kao rezultat hidrolize katalizirane enzimima.
X-gal je analog laktoze i stoga se može hidrolizirati enzimom β-galaktozidazom koji cijepa β-glikozidnu vezu u D-laktozi.X-gal, kada ga cijepa β-galaktozidaza, daje galaktozu i 5-bromo-4-kloro-3-hidroksiindol - 1. Potonji zatim spontano dimerizira i oksidira se u 5,5'-dibromo-4,4'-dikloro -indigo - 2, produkt intenzivno plave boje koji je netopljiv.X-gal je sam po sebi bezbojan, pa se stoga prisutnost plavo obojenog proizvoda može koristiti kao test za prisutnost aktivne β-galaktozidaze.Ovo također omogućuje da se bakterijska β-galaktozidaza (tzv. lacZ) koristi kao reporter u raznim primjenama.
U dvohibridnoj analizi, β-galaktozidaza se može koristiti kao reporter za identifikaciju proteina koji međusobno djeluju.U ovoj metodi, knjižnice genoma mogu se pregledati na interakciju proteina pomoću kvasca ili bakterijskog sustava.Gdje postoji uspješna interakcija između proteina koji se pretražuju, to će rezultirati vezanjem aktivacijske domene na promotor.Ako je promotor povezan s lacZ genom, proizvodnja β-galaktozidaze, koja rezultira stvaranjem plavo pigmentiranih kolonija u prisutnosti X-gal, stoga će ukazivati na uspješnu interakciju između proteina.Ova tehnika može biti ograničena na knjižnice pretraživanja veličine manje od oko 106. Uspješno cijepanje X-gal također stvara zamjetno neugodan miris zbog isparavanja indola.
Budući da je sam X-gal bezbojan, prisutnost plavo obojenog produkta može se koristiti kao test za prisutnost aktivne β-galaktozidaze.
Ova laka identifikacija aktivnog enzima omogućuje da se gen za βgalaktozidazu (gen lacZ) koristi kao reporterski gen u raznim primjenama.
