Proizvodi

CTP:fosfokolin citidililtransferaza α (CCTα) je nuklearni enzim koji katalizira korak koji ograničava brzinu u putu CDP-kolina za sintezu fosfatidilkolina (PC).Lipidna aktivacija CCTα rezultira njegovom translokacijom u jezgrinu ovojnicu i širenjem intranuklearne membranske mreže nazvane nukleoplazmatski retikulum (NR) mehanizmom koji uključuje deformaciju membrane.Nuklearni lamini također su potrebni za stabilnost i proliferaciju NR, ali nije poznato da li je ova jedinstvena struktura, ili nuklearna lamina općenito, potrebna za sintezu PC-a.Kako bi se ispitao ovaj odnos, nuklearna lamina je iscrpljena RNAi ili prekinuta ekspresijom Hutchinson-Gilford progeria sindroma (HGPS) mutantnog lamina A (progerin), te je analiziran učinak na CCTα i metabolizam kolina.Utišavanje lamina A/C ili lamina B1 u CHO stanicama posredovano siRNA-om kako bi se smanjio NR nije imalo učinka na sintezu PC-a, dok je dvostruki nokdaun nespecifično inhibirao put.Potvrđujući njegovu manju ulogu u sintezi PC-a, samo 10% prolazno prekomjerno izražene kolin/etanolamin fosfotransferaze otkriveno je u NR.U CHO stanicama, CCTα je bio nukleoplazmatski i ko-lokaliziran s GFP-progerinom u jezgrinim naborima i invaginacijama;međutim, HGPS fibroblasti pokazali su abnormalnu distribuciju CCTα u citoplazmi i jezgrinoj ovojnici koja je bila popraćena dvostrukim smanjenjem sinteze PC-a.Unatoč njegovoj promijenjenoj lokalizaciji, eksperimenti s označavanjem kolina pokazali su da aktivnost CCT nije bila promijenjena, a inhibicija sinteze PC-a povezana je sa smanjenom aktivnošću transportera kolina osjetljivog na hemikolinij.Zaključujemo da CCTα i lamini specifično surađuju u stvaranju NR, ali ukupna struktura nuklearne ovojnice ima minimalan utjecaj na CCT aktivnost i sintezu PC-a.