Proizvodi

Nuklearna akumulacija mutantnog oblika nuklearnog proteina Lamin-A, nazvanog Progerin (PG) ili Lamin AΔ50, javlja se u Hutchinson-Gilford Progerijinom sindromu (HGPS) ili Progeriji, bolesti ubrzanog starenja.Jedan od glavnih simptoma ovog genetskog poremećaja je gubitak potkožnog masnog tkiva zbog dramatične lipodistrofije. Stabilno smo inducirali ekspresiju ljudskog PG i GFP -zelenog fluorescentnog proteina- kao kontrole u stanicama 3T3L1 koristeći lentivirusni sustav za proučavanje učinak ekspresije PG na sposobnost diferencijacije ove stanične linije, jedan od najčešće korištenih adipogenih modela.Učinjena je kvantitativna proteomika (iTRAQ) kako bi se proučio učinak nakupljanja PG.Nekoliko moduliranih proteina potvrđeno je imunoblotingom i PCR-om u stvarnom vremenu.Funkcija mitohondrija analizirana je mjerenjem a) bazalne aktivnosti mitohondrija, b) proizvodnje superoksidnog aniona i c) pojedinačne učinkovitosti različitih kompleksa dišnog lanca. Otkrili smo da prekomjerna ekspresija PG lentiviralnom dostavom gena dovodi do smanjenje stope proliferacije i nedostataka u adipogenom kapacitetu u usporedbi s kontrolom.Kvantitativna proteomska analiza pokazala je 181 protein značajno (p<0,05) moduliran u preadipocitima koji eksprimiraju PG.Funkcija mitohondrija je oštećena u stanicama koje eksprimiraju PG.Točnije, detektirali smo povećanje aktivnosti kompleksa I i prekomjernu proizvodnju superoksidnog aniona.Inkubacija s hvatačima reaktivnih kisikovih vrsta (ROS) dovodi do smanjenja autofagne proteolize što je otkriveno omjerom LC3-II/LC3-I. Ekspresija PG u stanicama 3T3L1 potiče promjene u nekoliko bioloških procesa, uključujući strukturu citoskeleta, metabolizam lipida, kalcij regulacija, prevođenje, savijanje proteina i stvaranje energije u mitohondrijima.Naši podaci jačaju doprinos akumulacije ROS-a fenotipu preranog starenja i uspostavljaju vezu između mitohondrijske disfunkcije i gubitka proteostaze u HGPS-u.