Proizvodi

LecA (PA-IL) je citotoksični lektin i adhezin proizveden od Pseudomonas aeruginosa koji veže hidrofobne galaktozide s visokom specifičnošću i afinitetom.Koristeći fuziju translacije lecA-egfp i imunoblot analizu izvanstaničnog matriksa biofilma, pokazujemo da se lecA eksprimira u stanicama uzgojenim u biofilmu.U statičkim ispitivanjima biofilma na polistirenu i nehrđajućem čeliku, dubina i površinska pokrivenost biofilma smanjeni su mutacijom lecA i pojačani u soju PAO-P47 koji prekomjerno proizvodi LecA.Pokrivenost površine biofilma roditeljskim sojem, PAO-P47, ali ne i lecA mutantom na čeličnim kuponima također je inhibirana rastom u prisutnosti izopropil-beta-D-tiogalaktozida (IPTG) ili p-nitrofenil-alfa-D-galaktozida ( NPG).Nadalje, zreli biofilmovi divljeg tipa formirani u odsutnosti ovih hidrofobnih galaktozida mogu se raspršiti dodatkom IPTG.Nasuprot tome, dodavanje p-nitrofenil-alfa-L-fukoze (NPF) koja ima visok afinitet za lektime P. aeruginosa LecB (PA-IIL) nije imalo učinka na stvaranje ili raspršivanje biofilma.Na planktonski rast P. aeruginosa PAO1 nije utjecala prisutnost IPTG, NPG ili NPF, niti je soj bio u mogućnosti iskoristiti te šećere kao izvore ugljika, što sugerira da su promatrani učinci na stvaranje biofilma bili posljedica kompetitivne inhibicije LecA-liganda vezanje.Slični rezultati dobiveni su i za biofilmove uzgojene u uvjetima dinamičkog protoka na čeličnim kuponima, što sugerira da LecA doprinosi arhitekturi biofilma P. aeruginosa u različitim uvjetima okoliša.

Alfa-L-fukozidaza (EC 3.2.1.51) koja može otpustiti t-fukozilni ostatak iz bočnog lanca ksiloglukanskih oligosaharida otkrivena je u lišću biljke Arabidopsis.Štoviše, alfa-L-fukozidaza sa sličnom specifičnošću supstrata pročišćena je iz lišća kupusa (Brassica oleracea) kako bi se dobila jedna traka na SDS-PAGE.Dvije peptidne sekvence dobivene su iz ove proteinske trake i korištene su za identifikaciju gena Arabidopsis koji kodira alfa-fukozidazu koju predlažemo nazvati AtFXG1.Osim toga, pronađen je i gen Arabidopsis homologije s poznatim alfa-L-fukozidazama, a mi smo predložili da ga nazovemo AtFUC1.I AtFXG1 i ATFUC1 bili su heterologno eksprimirani u stanicama Pichia pastoris i aktivnosti alfa-L-fukozidaze izlučene u medij kulture.Alfa-L-fukozidaza koju kodira AtFXG1 bila je aktivna protiv oligosaharida iz ksiloglukana XXFG kao i protiv 2'-fukozil-laktitola, ali ne i protiv p-nitrofenil-alfa-L-fukopiranozida.Međutim, heterologno eksprimirani AtFUC1 bio je aktivan samo protiv 2'-fukozil-laktitola.Prema tome, prvi mora biti povezan s metabolizmom ksiloglukana.